密码子优化IL-18基因的合成与蛋白质高表达

来源 :中国伤残医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Jiangzi1125
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目的:为研究IL-18密码子优化合成与蛋白质高表达,更好的发挥IL-18在基础研究与临床中的应用,本研究采用野生型IL-18在大肠杆菌中表达高频率的密码子,自行设计8个PCR片段,用PCR;方法:得到IL-18的cDNA,利用EcoR I双酶切将其插入pGEX-4T-1载体中,转化大肠杆菌JM109。筛选出阳性菌落,提取质粒,转化大肠杆菌BL-21 DE3中进行表达,纯化。结果:显示:经纯化所获得的优化IL-18的氨基酸序列、生物学活性与野生型IL-18完全一致,蛋白质产量较野生型IL-18高约5倍。结论:本研究可以实现较高水平的蛋白质,也给纯化带来了方便,为大规模生产提供了较理想的表达株,同时为治疗性疫苗研究奠定了基础。
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