【摘 要】
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对原核表达载体pＥＴ３c进行改建，消去载体上非必要的ＥcoRⅠ、HindⅢ限制酶位点，然后在克隆位点BamHⅠ处引入ＬacZ片段，经此二步改建后的载体命名为pＪＮ９８２。该载体保留了pＥＴ３c高效表达外源基因的
【机 构】
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华南理工大学生物工程系,暨南大学生物工程研究所
【基金项目】
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国家“九五”科技攻关重点项目!(96 -C0 2 -0 1-0 3)经费资助
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对原核表达载体pＥＴ３c进行改建，消去载体上非必要的ＥcoRⅠ、HindⅢ限制酶位点，然后在克隆位点BamHⅠ处引入ＬacZ片段，经此二步改建后的载体命名为pＪＮ９８２。该载体保留了pＥＴ３c高效表达外源基因的能力，同时，其融合克隆位点由１个增至７个，并获得以目视法筛选重组子的能力。应用该载体在Ｅ.coliBL21(de3)pLysS中融合表达牛碱性成纤维细胞生长因子，表达量占菌体总蛋白３０.０４％。破碎菌体上清经阳离子交换和肝素亲和两步层析，得纯度为９５％的重组蛋白，活性检测显示，重蛋白具有与参照品一致
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