【摘 要】
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为了研究巨型艾美耳球虫顶膜抗原1(AMA1)的细胞定位及功能,制备了抗AMA1的单克隆抗体并进行了鉴定.首先,用大肠杆菌(DE3)表达了巨型艾美耳球虫AMA1蛋白,蛋白经纯化后免疫小鼠
【机 构】
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北京市动物疫病预防控制中心,北京大兴102629;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京海淀100193;中国农业大学动物医学院,北京海淀100193
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为了研究巨型艾美耳球虫顶膜抗原1(AMA1)的细胞定位及功能,制备了抗AMA1的单克隆抗体并进行了鉴定.首先,用大肠杆菌(DE3)表达了巨型艾美耳球虫AMA1蛋白,蛋白经纯化后免疫小鼠,测定小鼠血清中AMA1抗体滴度.然后进行杂交瘤细胞的制备和克隆筛选,获得了 16株分泌产生AMA1抗体的杂交瘤细胞株.最后用免疫印迹和间接免疫荧光试验对上述单克隆抗体进行鉴定.结果显示,编号为21和34的杂交瘤细胞株产生的抗体可识别巨型艾美耳球虫可溶性抗原中的AMA1组分;编号为34和35的抗体与巨型艾美耳球虫子孢子反应后,荧光信号集中于子孢子的顶质体和细胞膜部位.本试验制备的抗AMA1的单克隆抗体,为巨型艾美耳球虫生物学和免疫学研究提供了科学依据.
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