乳鼠心肌细胞的原代培养方法改良

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目的 探讨乳鼠原代心肌细胞分离、培养和纯化的方法,得到存活率高、搏动频率强、纯度高的心肌细胞。方法 采用0.08%胰蛋白酶及0.05%Ⅱ型胶原酶消化心脏组织,差速贴壁60 min,加入终浓度为0.1 mmol·L-1的5-Brdu纯化心肌细胞。倒置显微镜下观察不同时间心肌细胞形态学变化;记录心肌细胞搏动频率;台盼蓝染色,测定心肌细胞存活率。结果 心肌细胞生长状态良好,4 h开始贴壁,48~72 h基本完全贴壁,形成放射状排列的细胞簇,同步搏动;5~9 d心肌细胞搏动频率在80~110次·
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