用3'非编码区通用引物通过RT-PCR检测登革1~4型病毒RNA

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目的根据登革病毒(DEN)3端非编码区的一段高度保守序列,设计登革1~4型通用引物,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测登革病毒1~4型RNA.方法用C6/36细胞培养登革病毒.用热酚法提取病毒RNA,进行RT-PCR扩增,并对扩增产物测序.结果 DEN-2-NGC株可扩增出至少10TCID50的病毒,测序结果与已知序列一致.DEN-1~4型标准株和DEN-2-04与DEN-2-43株均能够扩增出唯一的一条特异条带.结论应用通用引物RT-PCR法可从病毒浓度少至10TCID50的感染细胞培养液中检出DEN-2-NGC株病毒,并且该对通用引物对于其他3型登革病毒亦具有很好的通用性,其方法的特异性和敏感性亦较强.
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