【摘 要】
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目的 建立一种间接ELISA法定量检测IgG型抗人IgE自身抗体，并初步评估慢性荨麻疹（CU）患者血清抗IgE含量。方法 选取2018年1至12月于上海市第一人民医院首诊的75例CU患者及120名健康体检者，收集相应血清样本及临床资料。以人IgE包被微孔板，加入人源化抗人IgE标准品（奥马珠单抗）或待检血清，再加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的抗人IgG，建立间接酶联免疫法，并进行条件优化及方法学
【机 构】
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上海交通大学附属第一人民医院检验科，上海 200080,上海交通大学附属第一人民医院皮肤科，上海 200080,上海交通大学附属第一人民医院皮肤科，上海 200080,上海交通大学附属第一人民医院检验
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目的 建立一种间接ELISA法定量检测IgG型抗人IgE自身抗体，并初步评估慢性荨麻疹（CU）患者血清抗IgE含量。
方法 选取2018年1至12月于上海市第一人民医院首诊的75例CU患者及120名健康体检者，收集相应血清样本及临床资料。以人IgE包被微孔板，加入人源化抗人IgE标准品（奥马珠单抗）或待检血清，再加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的抗人IgG，建立间接酶联免疫法，并进行条件优化及方法学评价。采用Mann-Whitney U检验、卡方检验分析CU患者及健康人血清IgE水平，采用受试者工作曲线（ROC）分析抗IgE对CU的诊断效能。
结果 IgE包被量5.0×10-4 mg/ml，血清稀释度1∶300，酶标抗体稀释度1∶100 000；标准曲线R2=0.996；批内及批间变异系数3.9%~7.5%、6.0%~8.2%；血红蛋白≤1.3 g/L、三酰甘油≤4.6 mmol/L、胆红素≤171 μmol/L时，对检测结果无明显影响；低、高浓度样品回收率95.9%、108.4%；空白限5.8×10-4 mg/ml，检出限1.8×10-3 mg/ml，定量限2.0×10-3 mg/ml；线性范围约2.0×10-3~354.4 mg/ml；抗IgE达354.4 mg/ml时未见钩状效应；血清4 ℃过夜、反复冻融6次后抗IgE水平保持稳定。CU患者血清抗IgE水平[19.0（1.9，58.6）mg/ml]显著高于健康人血清抗IgE水平[0.7（0.002，11.1）mg/ml]，P<0.001；当抗IgE截断值定为15.3 mg/ml时，CU患者阳性率为54.7%，显著高于健康对照（18.3%），P<0.001，AUC达0.736。
结论 成功建立血清抗IgE的间接ELISA法，CU患者血清中存在抗IgE自身抗体。
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