pcDNA3.0/mbcl-2α真核表达载体的构建及其在L929细胞中的表达与实验研究

来源 :苏州大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiang43
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目的构建重组真核表达载体pcDNA3.0/mbcl-2α,并在L929细胞中稳定表达,研究mbcl-2α基因表达对L929细胞生物学行为的影响.方法用PCR法从含mbcl-2α基因的载体pORF-mbcl-2α获得目的基因片段,正向克隆入真核表达质粒pcDNA3.0中.pcDNA3.0/mbcl-2α以脂质体法转染L929细胞,经G418加压筛选,获得阳性单克隆细胞,用RT-PCR检测克隆细胞中mbcl-2α基因的转录,细胞免疫组化染色法检测蛋白表达.台盼兰拒染法进行活细胞计数,判定细胞增殖速率;MTT比
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