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为了研制乙型脑炎病毒EⅢ-间接ELISA抗体检测试剂盒，将乙型脑炎病毒EⅢ基因克隆至原核表达载体pET-32a（＋），重组质粒转化大肠杆菌BL21进行诱导表达。以纯化后的重组蛋白EⅢ包被酶标板，优化ELISA反应条件，组装试剂盒。SDS—PAGE和Westernbloting分析表明，重组蛋白分子质量约为30ku，经IPTG诱导后高效表达，且具有来良好的免疫原性。优化试验确定重组抗原最佳包被浓度为4．7ug／mL，血清样本的阳性临界值为0．255。特异性试验结果表明，重组蛋白与猪瘟、猪伪狂犬、猪圆环病等多