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针对牛乳腺细胞体外培养存活周期短、转染效率低等特点,分别采用Ⅰ型、Ⅱ型胶原酶消化培养法及组织贴壁培养法,比较了牛乳腺细胞的生长、迁移、分化和凋亡等一系列特征。同时构建了携带绿色荧光蛋白报告基因的端粒酶融合表达载体pEGFP—hTERT,采用脂质体分别转染两种真核表达载体pEGFP—hTERT、pEGFP—C1,通过比较载体不同浓度、传代细胞转染适合密度及生长活力、转染后的荧光强度等检测转染效率。结果表明,第3代细胞接种密度大约70%,浓度为350ng/μL的载体适合于牛乳腺细胞的转染,转染效率大约为25%