【摘 要】
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目的比较不同方法分离的小鼠腹腔巨噬细胞的生物学特性并找出最优方法。方法采用3种方法分离小鼠腹腔巨噬细胞:5%淀粉肉汤小鼠腹腔注射3 d后灌洗(5%淀粉肉汤组);直接DMEM液腹
【机 构】
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中国医科大学基础医学院病理生理教研室,第二军医大学2008级临床医学8年制,第二军医大学附属长海医院脊柱外科
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目的比较不同方法分离的小鼠腹腔巨噬细胞的生物学特性并找出最优方法。方法采用3种方法分离小鼠腹腔巨噬细胞:5%淀粉肉汤小鼠腹腔注射3 d后灌洗(5%淀粉肉汤组);直接DMEM液腹腔灌洗(无血清DMEM组);含75%血清DMEM液腹腔注射30 min后灌洗(75%血清DMEM组),每组6只小鼠。观察各组巨噬细胞形态、计数细胞数量、流式细胞仪测细胞纯度、台盼蓝染色测细胞存活率、划痕实验测迁移能力及ELISA检测脂多糖(LPS)刺激后巨噬细胞分泌TNFα、IL-6及IL-1β的水平。结果 3组巨噬细胞的形态、纯度、存活率相似,75%血清DMEM组巨噬细胞数量为(80.47±0.82)×105个,明显多于5%淀粉肉汤组(5.64±0.31)×105个及无血清DMEM组(2.63±0.42)×105个(P<0.05);75%血清DMEM组巨噬细胞迁移能力明显高于其他两组(P<0.05);75%血清DMEM组巨噬细胞分泌TNFα(15.51±0.51)ng/m L、IL-6(415.33±1.55)pg/m L、IL-1β(421.01±2.64)pg/m L,均多于5%淀粉肉汤组TNFα(10.50±0.50)ng/m L、IL-6(386.33±1.52)pg/m L、IL-1β(375.33±2.51)pg/m L(P<0.05),也多于无血清DMEM组TNFα(9.56±0.25)ng/m L、IL-6(384.66±1.15)pg/m L、IL-1β(393.34±2.62)pg/m L(P<0.05)。结论 75%血清DMEM液腹腔注射30 min后灌洗是一个比较好的分离小鼠腹腔巨噬细胞的方法。
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