抗人Hb单克隆抗体的制备与鉴定

来源 :重庆医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chuanjie_zheng
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用超声波快速乳化人Hb,作为抗原免疫BALB/C小鼠,取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞经离心PEG法融合,微波ELISA筛选阳性克隆,获得三株分泌针对人Hb不同抗原位点的单克隆抗体杂交瘤细胞系。分别命名为Hb264、Hb210和Hb238。其中Hb264能特异识别人Hb的β链而不与动物Hb交叉反应;解离常数Kb为1.6×10 ̄(-8)mol/L,IgG_(2a)。Hb210能结合人Hb的α链,可被猪Hb抑制,但亲合力低100倍;Kd(人Hb)为2.8×10 ̄(-8)mol/L;Kd(猪Hb)为3.0×10 ̄(-4)mol/L;IgG_(2b)。Hb238是两个脾细胞与一个Sp2/0细胞融合而成的三体瘤(trioma);染色体132条;Hb238单克隆抗体可同人Hb的α和β链结合,Kd(人Hb)为8.9×10 ̄(-5)mol/L;IgG_(2a);经分析鉴定,Hb238是针对人Hbα和β链的双特异性抗体。本方法对免疫学隐血检测、法医学鉴定和双特异抗体的研制有一定意义。
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