【摘 要】
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目的运用基因克隆技术构建人源β1,4-半乳糖转移酶Ⅱ（β4Gal TⅡ）真核表达质粒,并将其转染到COS7细胞中,观察蛋白在细胞内的定位,同时转染到HEK 293T细胞中检测其表达。方法分
【机 构】
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安徽医科大学生命科学学院生物学教研室
【基金项目】
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国家自然科学基金青年科学基金项目（编号：81201368）
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目的运用基因克隆技术构建人源β1,4-半乳糖转移酶Ⅱ（β4Gal TⅡ）真核表达质粒,并将其转染到COS7细胞中,观察蛋白在细胞内的定位,同时转染到HEK 293T细胞中检测其表达。方法分别设计带FLAG标签和GFP标签的β4Gal TⅡ基因的特异性引物,以含人β4Gal TⅡ全长c DNA序列为模板,定向构建到pc DNA3.1（＋）及p CDGFP真核表达载体中,构建重组表达质粒。通过酶切和测序鉴定阳性重组质粒,利用Lipofectamine 2000分别转染COS7、HEK 293T细胞,免疫荧光显
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