【摘 要】
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目的：构建MDR1基因原核表达质粒,表达P-gp重组蛋白,建立检测MDR1抗体的间接ELISA方法。方法：利用重组PCR技术扩增MDR1基因的1kb片段,克隆至pET-28b（＋）中,构建原核表达质粒pETP-gp,
【机 构】
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吉林农业大学生命科学学院,吉林油田总医院
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目的：构建MDR1基因原核表达质粒,表达P-gp重组蛋白,建立检测MDR1抗体的间接ELISA方法。方法：利用重组PCR技术扩增MDR1基因的1kb片段,克隆至pET-28b（＋）中,构建原核表达质粒pETP-gp,转染感受态菌BL21（DE3）和BL21（DE3）plyss;以E.coli高效表达的P-gp基因主要抗原编码区重组蛋白为抗原,以HRP标记的兔抗人IgG为二抗,建立间接ELISA检测方法。结果：正确构建了pETP-gp原核表达质粒,并可在E.coli中高效表达,表达蛋白可用作检测MDR1抗体
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