在对感染西伯利亚百合的CMV、LSV、LmoV 3种病毒的检测上,对4种常见的RNA提取方法及影响RT-PCR体系的因素进行了比较研究。改良优化了的RNA提取方法,不需用DEPC水处理和高温烘器皿,省去液氮研磨过程,采用该法从百合叶片中提取总RNA,整个过程及后继反应均不需使用RNasin,降低了成本,同时提取的RNA质量高,适于后期RT-PCR的检测,更适合于百合幼嫩叶片和试管苗RNA的提取。运用一步法,建立了CMV、LSV、LMoV 3种病毒的RT-PCR优化体系,最优反应体系为:M-MLV 5×Reaction Buffer 1μL1、0×PCR buffer0.5μL2、.5 mM dNTPs(each)0.8μL1、0 pmol/μL下游引物0.2μL1、0 pmol/μL上游引物0.2μL、M-MLVRT 200 U/μL 0.1μL2、.5 U/μL Taq polymerase 0.1μL;0.4μL感病材料RNA提取液,剩余部分用无菌双蒸水补足,使反应体系达到10μL。