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目的 对比应用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)结合导流杂交技术检测生殖道病原微生物的DNA与应用实时荧光核酸恒温扩增技术(simultaneous amplification and testing,SAT)检测生殖道病原微生物的RNA(SAT-RNA法)的效果,探讨其临床应用价值.方法 随机选取2019年12月至2020年2月期间在清华大学附属北京清华长庚医院就诊的82例疑似生殖道病原微生物感染患者作为研究对象.对82例患者均进行PCR结合导流杂交技术检测淋病奈瑟菌(neisseria gonorrhoeae,NG)、沙眼衣原体(chlamydia trachomatis,CT)、解脲脲原体(ureaplasma urealyticum,Uuu)、微小脲原体1/3/6/14 (ureaplasma parvum1/3/6/14,Uup 1/3/6/14)、人型支原体(M.hominis,Mh)、生殖支原体(mycoplasma genitalun,MG)和单纯疱疹病毒Ⅱ型(herpes simplex virus type Ⅱ,HSV-Ⅱ);同时82例患者中,用SAT-RNA法检测70例患者的NG、76例患者的CT、34例患者的MG、29例患者的UU;以Sanger测序结果为金标准,对比用这两种方法的检测结果.结果 两种方法检测NG和MG一致性的标本占100.00％;两种检测方法检测CT一致性的标本占98.68％(75/76),1例差异标本PCR结合导流杂交技术检测结果与Sanger测序结果一致;两种检测方法检测UU一致性的标本占82.76％ (24/29),5例差异标本结果中,3例与PCR结合导流杂交技术检测结果相符,2例与SAT-RNA检测结果相符,且PCR结合导流杂交技术对UU进行分型,Uuu、Uup1、Uup3、Uup6、Uup14的阳性率分别为6.10％(5/82)、6.10％(5/82)、19.51％(16/82)、9.76％(8/82)、6.10％(5/82).同时,PCR结合导流杂交技术还可以检测Mh和HSV-Ⅱ,阳性率分别为10.98％(9/82)、3.66％(3/82).结论 PCR结合导流杂交技术检测CT、UU的特异度和准确率高于SAT-RNA法,其可有效检测出病原体的协同感染和单一感染情况,且可对UU进行分型,为判断致病性感染与正常携带、有效避免漏诊误诊提供了更精准的检测依据.