【摘 要】
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目的分析恶性疟原虫富组氨酸蛋白Ⅱ/Ⅲ(Pf HRPⅡ/Ⅲ)的序列多态性。方法采集云南疟疾流行区恶性疟患者血样20份,血涂片后镜检,并进行疟疾快速诊断试剂检测(RDTs),同时提取各
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目的分析恶性疟原虫富组氨酸蛋白Ⅱ/Ⅲ(Pf HRPⅡ/Ⅲ)的序列多态性。方法采集云南疟疾流行区恶性疟患者血样20份,血涂片后镜检,并进行疟疾快速诊断试剂检测(RDTs),同时提取各血样中恶性疟原虫基因组DNA,进行PCR扩增Pfhrp2和Pfhrp3核酸片段并测序。使用Bioedit软件对Pfhrp2和Pfhrp3基因序列进行比对,使用TRANSEQ软件推导出其编码的氨基酸序列。结果 20份血样经镜检和RDTs检测均为恶性疟原虫阳性。PCR扩增结果显示,各血样的Pfhrp2核酸片段约389~986 bp,Pfhrp3核酸片段大小约329~640 bp,应用测序获得的核酸序列推导出相应的氨基酸序列,Pf HRPⅡ氨基酸残基序列以1型(AHHAHHVAD)起始并最终以12型(AHHAAAHHEAATH)作为结尾,Pf HRPⅡ特征性氨基酸残基重复序列数量相对较多的分别有7型(AHHAAD)、2型(AHHAHHAAD)和6型(AHHATD);Pf HRPⅢ含有重复较多的型别是16型(AHHAAN)和17型(AHHDG);Pf HRPⅡ和Pf HRPⅢ均未发现11型(AHN)。结论 20份恶性疟患者血样中Pfhrp2和Pfhrp3存在诸多的核酸变异,Pf HRPⅡ和Pf HRPⅢ共享一些特征性重复序列。
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