【摘 要】
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目的:建立定量检测U.Urealyticum(UU)、U.Parvum(UP)的灵敏、特异的荧光定量PCR方法.方法:选择uu和UP的尿素酶基因设计两对引物和对应的探针组建2个TaqMan PCR反应体系,应用
【机 构】
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湖北出入境检验检疫局,武汉,430070武汉大学生命科学学院,武汉,430072;
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目的:建立定量检测U.Urealyticum(UU)、U.Parvum(UP)的灵敏、特异的荧光定量PCR方法.方法:选择uu和UP的尿素酶基因设计两对引物和对应的探针组建2个TaqMan PCR反应体系,应用克隆的质粒建立系列标准品,作为模板建立荧光定量PCR标准曲线,并做重复性试验和特异性分析.结果:UU和uP两标准曲线具有良好的线性关系,相关系数分别为0.9895和0.9956,无非特异性扩增.结论:应用实时TaqMan PCR法定量检测UU、UP,具有快速、特异、灵敏、便捷的特点,为解脲脲原体感染的流行病学和病理机制的研究奠定了基础.
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