【摘 要】
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目的利用人类端粒酶逆转录酶(hTERT)基因反义寡核苷酸(ASODN)抑制K562细胞端粒酶活性后,探讨顺铂对K562细胞凋亡的影响.方法采用聚合酶链反应-酶联免疫吸附法(PCR-ELISA)检测端粒酶活性的变化;以间接免疫荧光标记法通过流式细胞仪检测hTERT蛋白表达含量的变化.琼脂糖凝胶电泳分析细胞凋亡的DNA断裂;用流式细胞仪对细胞凋亡峰进行定量分析.结果hTERT基因ASODN作用于K56
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目的利用人类端粒酶逆转录酶(hTERT)基因反义寡核苷酸(ASODN)抑制K562细胞端粒酶活性后,探讨顺铂对K562细胞凋亡的影响.方法采用聚合酶链反应-酶联免疫吸附法(PCR-ELISA)检测端粒酶活性的变化;以间接免疫荧光标记法通过流式细胞仪检测hTERT蛋白表达含量的变化.琼脂糖凝胶电泳分析细胞凋亡的DNA断裂;用流式细胞仪对细胞凋亡峰进行定量分析.结果hTERT基因ASODN作用于K562细胞后,hTERT蛋白的表达水平及端粒酶活性下降;ASODN作用于K562细胞24h再加入顺铂作用72 h,经琼脂糖凝胶电泳即可见到DNA梯形条带,而正义寡核苷酸(SODN)与顺铂联合作用组及单独应用顺铂均未见到明显的DNA梯形条带.hTERT基因ASODN作用于K562细胞24h,再加入5μmol/L顺铂作用48,72h的凋亡细胞百分率(17.43%和20.34%)分别与SODN联合顺铂作用组(7.43%和9.23%)、单用顺铂作用组(5.49%和7.34%)进行比较,差异有显著性(P＜0.01).结论以hTERT基因mRNA起始密码区为靶点的ASODN能特异性地抑制K562细胞的端粒酶活性;端粒酶活性的下调可促进顺铂诱导K562细胞凋亡.
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C:WindowsWebWallpaperrn里面是Windows自带墙纸,不需要的可以删除掉,或者转移至其他盘(45.5M).rnC:WindowsSystem32DriverStore/Fil-eRepositoryrn这个文件夹中是Windows自