【摘 要】
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目的：构建齿垢密螺旋体TDE2037基因的原核表达质粒,表达及纯化TDE2037精氨酸激酶蛋白。方法：以齿垢密螺旋体基因组DNA为模板,PCR扩增TDE2037基因,PCR产物经限制性内切酶消化后,
【机 构】
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广西医科大学口腔医学院牙体牙髓科,美国阿拉巴马大学伯明翰分校牙学院儿牙系,首都医科大学宣武医院口腔科
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(No.81160133)
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目的：构建齿垢密螺旋体TDE2037基因的原核表达质粒,表达及纯化TDE2037精氨酸激酶蛋白。方法：以齿垢密螺旋体基因组DNA为模板,PCR扩增TDE2037基因,PCR产物经限制性内切酶消化后,由T4 DNA连接酶连接原核表达载体pET-21a以及pET28a-SUMO,连接产物分别转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞,IPTG诱导表达目的蛋白,采用镍柱亲和层析法纯化目的蛋白,并使用分子排阻预装柱提高蛋白纯度。结果：成功构建TDE2037基因的原核表达质粒,经测序与基因库（Genbank）的TDE
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