半滑舌鳎两种leptin基因的体外重组表达和生物活性分析

来源 :水产学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：rsbgrc

【摘要】

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根据半滑舌鳎lepa和lepb编码氨基酸序列合成开放阅读框ORF肽段。利用原核表达载体pEQ30成功构建了半滑舌鳎lepa/pQE30和lepb/pQE30重组质粒,分别转化至大肠杆菌M15后,经IPTG

【作者】

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张雅星王滨柳学周徐永江史宝姜燕崔爱君张正荣孙

【机构】

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中国水产科学研究院黄海水产研究所,青岛海洋科学与技术试点国家实验室,上海海洋大学水产与生命学院

【出处】

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水产学报

【发表日期】

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2019年11期

【关键词】

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半滑舌鳎 LEPTIN 原核表达生物活性 Cynoglossus semilaevis leptin prokaryotic expression bioac

【基金项目】

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山东省重点研发计划(2018GHY115044),山东省支持青岛海洋科学与技术试点国家实验室重大科技专项(2018SDKJ0303-1,2018SDKJ0501-2),中国水产科学研究院基本科研业务费专项(2019GH15),海水鱼产业技术体系专项(CARS-47),农业农村部“一带一路”沿线热带国家水产养殖科技合作项目.

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根据半滑舌鳎lepa和lepb编码氨基酸序列合成开放阅读框ORF肽段。利用原核表达载体pEQ30成功构建了半滑舌鳎lepa/pQE30和lepb/pQE30重组质粒,分别转化至大肠杆菌M15后,经IPTG诱导获得了N端含6个组氨酸的半滑舌鳎LepA和LepB重组蛋白。获得的重组蛋白大小均为16ku,37℃下用0.5mmol/L的IPTG诱导4h后目的蛋白表达量最高,主要以包涵体形式存在。检测半滑舌鳎LepA和LepB重组蛋白浓度分别为0.3和0.25mg/mL。Westernblot免疫印迹和质谱分析表明

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