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应用PCR方法扩增猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(Actinabacillus pleuropneumoniae,App)编码毒素ⅢA结构蛋白的完整基因,连接到载体pMD18-T中,经NotI和SnabI双酶切后连接到用同样酶切的表达载体pPIC9k上,转化GS115酵母感受态细胞,经甲醇诱导表达了分泌到胞外的ApxⅢA蛋白。SDS-PAGE分析显示,表达的蛋白约为110000,与预期相符。Dot-blot和ELISA检测结果表明,表达蛋白具有良好的抗原性和特异性。为进一步研究ApxⅢA蛋白的结构和功能,研制A