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在鱼类胚胎冷冻保存中，由于胚胎体积大、卵膜具多层结构，并且通透性差，传统的平衡法无法使抗冻剂足够、有效的进入胚胎内部起到保护作用。为弥补了普通平衡法的不足，此研究利用显微注射技术，将抗冻剂直接注射到鱼类胚胎卵黄囊内，提高了抗冻剂对胚胎的保护程度。此研究以牙鲆胚胎为试验材料，对显微注射抗冻剂种类、抗冻剂的注射剂量、注射浓度、以及抗冻剂注射后胚胎的冷敏感性影响进行了筛选。结果表明：牙鲆胚胎较适宜的显微注射剂量为750pl；几种抗冻剂注射牙鲆胚胎后的毒性大小相对排列为PVP〉蔗糖，DMSO〉MeOH〉PG，其中