【摘 要】
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随机选取5份待检测老年痴呆症的唾液标本,等量混合后提取基因组DNA并通过PCR扩增人第19号染色体上的载脂蛋白E(AOPE)基因,再与PMD-19T质粒连接构建重组质粒,转入DH5α感受态
【机 构】
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苏州工业园区服务外包职业学院,健路生物科技有限公司
【基金项目】
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苏州市高职高专院校教改项目（2017SZJG015）
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随机选取5份待检测老年痴呆症的唾液标本,等量混合后提取基因组DNA并通过PCR扩增人第19号染色体上的载脂蛋白E(AOPE)基因,再与PMD-19T质粒连接构建重组质粒,转入DH5α感受态细胞中。经菌液PCR和测序鉴定为阳性的克隆抽取其质粒,以此重组质粒为模板通过PCR对AOPE基因的rs7421位点G突变为T,构建的突变质粒经qPCR鉴定,得到相应的荧光值,不同基因型的结果分成三类聚类图:CC型(野生纯合),CR型(杂合突变)和RR型(纯合突变),将得到的荧光数据值上传到生物信息数据库当中,以此为依据可以从AOPE基因层面上对待检测对象的阿尔茨海默病发病风险做出评估。
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