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目的
检测白癜风患者血清抗黑素细胞胞质和胞膜蛋白质抗体,并鉴定高识别率的胞膜抗原;检测白癜风患者血清抗酪氨酸酶相关蛋白1(TRP-1)抗体与热休克蛋白70(HSP70),并探讨二者的关系。
方法体外培养高纯度正常人黑素细胞,间接免疫荧光法检测抗黑素细胞抗体并对相关抗原定位,裂解黑素细胞并抽提蛋白质,免疫印迹法检测50例白癜风患者血清(4例HBsAg阳性),并用蛋白质谱分析技术鉴定相关胞膜抗原;ELISA法检测70例白癜风患者血清(10例HBsAg阳性)抗TRP-1抗体和HSP70。
结果间接免疫荧光法显示白癜风相关抗原位于黑素细胞胞质及胞膜上。免疫印迹法检测显示,膜抗原阳性率为80%,相应膜抗原相对分子质量(Mr)大约为86×103、75×103、60×103、52×103、44×103,各条带阳性率分别为36%、58%、22%、2%、2%;胞质抗原阳性率为30%,其Mr约为110×103、90×103、75×103、50×103、40×103,各条带的阳性率分别为12%、4%、12%、10%、2%。20例对照血清胞膜抗原和胞质抗原阳性率分别为15%和5%。白癜风组均明显高于对照组。蛋白质谱鉴定显示:Mr为86×103和75×103的膜抗原为Lamin A/C,Mr为60×103的膜抗原为Vimentin X1。在合并乙型肝炎的白癜风患者血清中存在高水平的抗TRP-1抗体与HSP70,并且二者浓度呈显著正相关性(r=0.927,P<0.01)。
结论通过蛋白质谱鉴定,发现了一种新的白癜风相关黑素细胞膜抗原,对白癜风自身免疫机制的研究有重要意义。通过检测血清抗TRP-1抗体和HSP70,初步探讨了HBV感染与白癜风发病的关系。