【摘 要】
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采用CTAB法提取叶片DNA,通过单因素试验,研究了TaqDNA聚合酶用量、dNTP、引物和Mg2+浓度4种因素对伊贝母ISSR-PCR扩增的影响。结果表明,适于伊贝母ISSR-PCR的反应体系为25μL
【机 构】
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沈阳农业大学,新疆中药民族药研究所,
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采用CTAB法提取叶片DNA,通过单因素试验,研究了TaqDNA聚合酶用量、dNTP、引物和Mg2+浓度4种因素对伊贝母ISSR-PCR扩增的影响。结果表明,适于伊贝母ISSR-PCR的反应体系为25μL总体积中含1×PCR反应缓冲液(无Mg2+)、1.0 UTaqDNA聚合酶、0.6 mmol/L dNTPs、0.4μmol/L引物、1.5 mmol/L MgCl2。
The leaf DNA was extracted by CTAB method. The effects of Taq DNA polymerase dosage, dNTP, primer and Mg2 + concentration on ISSR-PCR amplification were studied by single factor experiments. The results showed that the suitable reaction system for ISSR-PCR was as follows: 1 × PCR reaction buffer (no Mg 2+), 1.0 UTaq DNA polymerase, 0.6 mmol / L dNTPs, 0.4 μmol / L primer, / L MgCl2.
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