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目的:在大肠杆菌中表达具有活性的重组人脂联素蛋白。方法:利用PCR技术扩增人脂联素基因完全编码序列,选用Gateway原核表达体系,经过BP反应、LR反应两步反应,将PCR产物克隆人pET—DEST42质粒,构建融合表达载体pET—DEST42/attB—adiponectin,转化大肠杆菌BL21(DE3),以异丙基硫代-β—D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达脂联素融合蛋白,经镍柱亲和层析纯化,NDSB201高效复性后,使重组蛋白作用于体外培养的肝细胞。RTPCR法检测重组脂联素对肝细胞葡萄糖-6-磷酸酶