猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白的原核表达及多克隆抗体制备

来源 :中国动物检疫 | 被引量 : 0次 | 上传用户：sjhung888

【摘要】

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为体外表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)糖基化囊膜蛋白GP5,以及制备其多克隆抗体,以PRRSV PC疫苗株RNA为模板,应用RT-PCR扩增GP5基因,并克隆至原核表达载体pET-32a(+),构

【作者】

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乌吉斯古楞刘亭岐巨敏莹张斌韩宇刘建奇宋庆庆关平

【机构】

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内蒙古农业大学兽医学院,金宇保灵生物药品有限公司

【出处】

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中国动物检疫

【发表日期】

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2020年10期

【关键词】

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猪繁殖与呼吸综合征病毒糖基化囊膜蛋白GP5 原核表达多克隆抗体 PRRSVglycosylated envelope proteinprokaryotic

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为体外表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)糖基化囊膜蛋白GP5,以及制备其多克隆抗体,以PRRSV PC疫苗株RNA为模板,应用RT-PCR扩增GP5基因,并克隆至原核表达载体pET-32a(+),构建重组表达载体pET-32a-GP5。经过酶切和测序鉴定后,将阳性重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,加入IPTG低温诱导表达。使用亲和层析法纯化PRRSV GP5蛋白。然后将纯化的蛋白免疫北京大耳白兔制备多克隆抗体,并进行酶联免疫吸附试验(ELISA)和间接免疫荧光分析(IFA)。结果

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