大黄酸兔源多克隆抗血清的制备与鉴定

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目的合成大黄酸人工抗原,制备敏感性高、特异性强的大黄酸兔源多克隆抗血清。方法采用碳二亚胺法制备大黄酸人工抗原,将大黄酸分别与牛血清白蛋白和卵清蛋白相偶联。用紫外扫描法鉴定大黄酸人工抗原是否偶联成功,免疫新西兰兔,制备多抗血清,通过间接竞争ELISA测定抗血清效价,通过间接竞争ELISA鉴定抗血清的敏感性和特异性,并分别用间接竞争ELISA和HPLC检测大黄中大黄酸的含量。结果2只新西兰兔产生的多抗血清效价在1∶64000以上,其中,2号兔多抗血清敏感性最好,半数抑制浓度为0.09ng/mL,且具有良好的特
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