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目的：构建hsa-miR-26b沉默载体，与其靶基因PTEN共转染HEK-293T细胞验证其沉默效果。 方法：用miRNA海绵体技术设计并合成与hsa-miR-26b成熟序列反向互补的3个重复序列的双链DNA，将短发卡状RNA（shRNA）克隆入LV3-GFP-Puro载体，与靶基因PTEN共转染HEK-293T细胞，于24 h后收集细胞RNA，用real-time PCR检测hsa-miR-26b表达水平，同时用双荧光素报告系统检测其对靶基因的作用。 结果：成功构建了有效的hsa-miR-26b沉默载体