【摘 要】
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目的探讨miR-374b在增强细胞因子诱导杀细胞(CIK)抗肿瘤中的作用及机制。方法采用传统方法培养CIK,用流式细胞确定CIK细胞群且分选出CIK;流式分析Hep G2、PLC、H1299、A549的
【机 构】
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海南医学院第一附属医院肿瘤内科海南医学院第一附属医院肿瘤学部
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目的探讨miR-374b在增强细胞因子诱导杀细胞(CIK)抗肿瘤中的作用及机制。方法采用传统方法培养CIK,用流式细胞确定CIK细胞群且分选出CIK;流式分析Hep G2、PLC、H1299、A549的程序性坏死蛋白(PD)-L1表达;采用双荧光素酶系统检测miR-374b在PD-1上的结合,siRNA技术干扰降低miR-374b基因的表达;酶联免疫吸附(ELISA)检测CIK的γ干扰素(IFN-γ)表达;乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测CIK体外杀伤肿瘤细胞的能力;过继回输检测CIK体内杀伤肿瘤细胞的能力。结果双荧光素酶系统显示miR-374b可以直接作用于PD-1基因上;Hep G2、PLC、H1299、A549肿瘤细胞系都有比较高的PD-L1表达;miR-374b抑制剂会降低CIK分泌IFNr的水平,抑制CIK在体内和体外对肿瘤细胞的杀伤能力;PD-1 siRNA会提高CIK分泌IFN-γ的水平,增强CIK在体内和体外对肿瘤细胞的杀伤能力。结论 miR-374b可以直接作用于PD-1基因的表达,抑制miR-374b可以增强CIK杀伤肿瘤能力,干扰PD-1表达可以提高CIK抑制肿瘤能力。
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