TLR4通路在软脂酸诱导人血管平滑肌细胞IL-6基因表达中的作用

来源 :中华内分泌代谢杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lintso1101
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构建Toll样受体4(TLR4)shRNA腺病毒表达载体(pGSadeno-TLR4)并感染人主动脉血管平滑肌细胞(HA-VSMC),采用软脂酸和不同的信号通路阻断剂处理HA-VSMC,以实时定量PCR检测白细胞介素6(IL-6) mRNA的表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测NF-κB p65活性和IL-6的蛋白水平.结果显示,软脂酸增加HA-VSMC IL-6 mRNA和蛋白水平,且具有明显的剂量依赖关系,软脂酸(400 μmol/L)处理6h作用最明显,IL-6 mRNA的表达水平为对照组的10.43倍(P<0.01).IL-6蛋白水平在软脂酸作用24h时达到峰值,约为对照组的2.18倍(P<0.01).NF-κB阻断剂parthenolide下调软脂酸诱导的IL-6 mRNA和蛋白表达分别为65%和59%(均P<0.01),蛋白激酶C(PKC)阻断剂白屈菜红碱下调软脂酸诱导的IL-6mRNA和蛋白表达分别为24%和28%(均P<0.05).而细胞外信号调节激酶抑制剂PD98059和磷酸肌醇3激酶抑制剂wortmannin对软脂酸诱导的IL-6 mRNA和蛋白表达均无明显作用(均P>0.05).pGSadeno-TLR4下调软脂酸诱导的IL-6 mRNA和蛋白表达分别为72%和75%(均P<0.01),下调软脂酸刺激的NF-κB p65活性约62% (P<0.01).这些结果提示TLR-4/NF-κB和PKC信号通路介导了软脂酸诱导的人主动脉血管平滑肌细胞IL-6基因表达。

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