用PCR-差别筛选法分离和克隆水稻受稻瘟病菌诱导的cDNA片段

来源 :中国农业科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong466
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以水稻抗瘟性近等基因系H7R和H7S为材料,采用PCR-差别筛选(PCR-baseddif-ferentialscreening)的方法分离和克隆水稻受稻瘟病菌诱导的抗性相关基因。第一轮筛选获得42个差异表达的cDNA克隆,经PCR扩增,转膜,反向Northern杂交后,得到12个阳性cDNA克隆。Northern证实其中一个克隆(暂命名为D2,约2.2kb)为受稻瘟病菌诱导的特异反应基因(片段)。 The resistance genes of rice blast induced by Magnaporthe grisea were isolated and cloned by PCR-based differential-screening (PCR-baseddif-ferentialscreening) using the rice isogenic lines H7R and H7S. Forty-two differentially expressed cDNA clones were obtained in the first round of screening, and 12 positive cDNA clones were obtained after PCR amplification, transfection and reverse Northern blotting. Northern confirmed that one of the clones (tentatively named D2, ca. 2.2 kb) is a specific response gene (fragment) induced by Magnaporthe grisea.
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