用宿主范围扩大的重组AcNPV在家蚕中表达TNF

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用宿主范围扩大的核型多角体病毒双穿梭载体Bonpvid与重组转座质粒pFast-TNF转座,使含有TNF基因的表达盒插入Bonpvid的Tn7 att的接受位点筛选阳性重组E.coli菌落.将提取的阳性重组子DNA分别转染家蚕BmN细胞和Sf-9细胞,获得了能表达TNF的重组病毒.SDS-PAGE和Western blot分析表明,TNF在上述两种细胞中得到表达.以家蚕作为生物反应器,将含有重组病毒的细胞上清注射感染家蚕4龄幼虫,使TNF在蚕体表达.用BmN细胞中表达的TNF感染肿瘤细胞,诱导细胞发生了凋
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