【摘 要】
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目的:研究HBsAg DNA重组减毒鼠伤寒沙门氏菌的免疫性与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因EGFPC3在小鼠体内的表达.方法:将质粒pcDNA3s与pEGFPC3分别电转化减毒鼠伤寒沙门氏菌SL87
【机 构】
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江南大学食品学院食品营养与安全研究所,江苏畜牧兽医职业技术学院营养与饲料研究所
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目的:研究HBsAg DNA重组减毒鼠伤寒沙门氏菌的免疫性与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因EGFPC3在小鼠体内的表达.方法:将质粒pcDNA3s与pEGFPC3分别电转化减毒鼠伤寒沙门氏菌SL8786, 构建重组减毒鼠伤寒沙门氏菌SL8786/EGFPC3与SL8786/pcDNA3s.利用时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)检测小鼠的血清抗体的含量, 以及重组菌引起的T细胞增殖和细胞毒性T淋巴细胞(CTL)应答.用荧光显微镜观察EGFPC3表达.结果:口服SL8786/pcDNA3s免疫小鼠后, 可诱导产生较强的特异性CTL应答.口服免疫小鼠后第11周抗-HBs含量最高.用流式细胞术检测贴壁培养的2只小鼠的脾细胞中SL8786/EGFPC3阳性率分别为19.20%和17.36%, 而SL8786/pcDNA3口服的2只小鼠脾细胞中的EGFP阳性率分别仅为1.95%和1.63%.给小鼠口服SL8786/EGFPC3 3周后, 在小鼠肝脏、脾脏、肾脏、胸腺、十二指肠及肌肉等组织中, 均有EGFPC3的表达.结论:口服SL8786/pcDNA3s在小鼠体内诱导了特异性细胞和体液免疫应答.携带EGFPC3的重组鼠伤寒沙门氏菌SL8786/EGFPC3在小鼠的部分组织中产生绿色荧光表达, 该重组菌的构建为减毒沙门氏菌作为活载体基因工程疫苗的研制提供了一个优良模型.
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