【摘 要】
：
目的:构建IL-1ra-Fcε融合基因的真核表达载体pCI-neo-IL-1ra- Fcε,研究其在体外的表达情况.方法:利用RT-PCR方法从哮喘大鼠脾细胞中克隆大鼠IgE 恒定区cDNA,同时从载体pBV2
【机 构】
：
军事医学科学院基础医学研究所,河北大学药学院
论文部分内容阅读
目的:构建IL-1ra-Fcε融合基因的真核表达载体pCI-neo-IL-1ra- Fcε,研究其在体外的表达情况.方法:利用RT-PCR方法从哮喘大鼠脾细胞中克隆大鼠IgE 恒定区cDNA,同时从载体pBV220-IL-1ra中克隆IL-1ra基因.利用重叠延伸PCR技术合成了IL-1ra-Fcε融合基因.将其克隆入真核表达载体pCI-neo,以脂质体法转染293T细胞,G418筛选稳定表达细胞株.利用Western印迹、RT-PCR验证融合蛋白的表达,并在EL-4/CTLL-2细胞中对融合蛋白活性进行了验证.结果和结论:成功构建了pCI-neo-IL-1ra- Fcε表达载体,Western 印迹、RT-PCR验证融合蛋白在293T细胞得到表达,并获得了稳定表达IL-1ra- Fcε的细胞株.表达的融合蛋白在体外具有拮抗IL-1的功能.为过敏性哮喘基因治疗奠定了基础.
其他文献
目的 研究靶向缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和人端粒酶逆转录酶(hTERT)的短发夹RNA(shRNA),对裸鼠皮下人脑胶质瘤中HIF-1α、hTERT基因表达的抑制作用,及其对肿瘤增殖和细胞凋
目的:观察高同型半胱氨酸血症(HHcy)患者外周血内皮祖细胞(EPCs)数量和功能的变化。方法:入选患者60例,其中HHcy患者30例(HHcy组),非HHcy患者30例(对照组)。采用全自动荧光偏
通过对渤海湾西岸1895年以来11次风暴潮高水位的厘定,证实并确定了50年、100年、200年直至10000年一遇的风暴潮高水位值。定量评估了风增水与波浪对风暴潮高水位的贡献。进一
目的 探讨强直性脊柱炎(AS)患者血清基质金属蛋白酶-1、3、9(MMP-1、3、9)水平及意义.方法 采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)测定45例As患者和31例正常对照者的血清MMP
历史制度主义认为,制度是牵引与维系各种规则、关系或场域的一种纽带,并以一种独特的结构被安置在特定的时空中。作为西方政治民主重要构件的欧美政党制度,就是在特定的历史
目的 研究我国北方地区B亚型HIV-1感染者病毒基因组中nef基因多态性、重要功能区的保守程度,探索其与疾病进展的关系.方法 HIV-1 B亚型感染长期不进展者(LTNP)30例,典型进展
目的 观察腺苷A1受体(A1R)敲除小鼠癫痫点燃过程中神经超微病理损伤,探讨腺苷A1受体的脑保护作用.方法 动物分为野生型、纯合子及敲除组3组,选择皮层、小脑、海马、脑干4个部
目的:分析铜绿假单胞菌(pseudomonas aeruginoso,,PA)的LesA与其靶位点的特异性结合的特性.方法:以PCR法扩增PA的LexA基因,将其克隆于原核表达载体pET-22b(+),转化大肠埃希菌
对5种五味子属(Schisandra)药用植物(小花五味子Schisandra micrantha,狭叶五味子S. lancifolia,滇翼梗五味子S. henryi var. yunnanensis var. yunnanensis,复瓣黄龙藤S. Pl
广东省佛山地区处于珠三角腹地,气候炎热潮湿,陶瓷、纺织等支柱产业一度给城市环境造成极大污染,变应性鼻炎是佛山地区的常见病、多发病,近年来其发病率呈明显上升趋势,给患