【摘 要】
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目的:探讨苦木碱F调控miR-331-3p在宫颈癌HeLa细胞增殖及凋亡中的作用及机制.方法:MTT法检测苦木碱F对宫颈癌H eLa细胞增殖的影响;流式细胞术检测苦木碱F对宫颈癌H eLa细胞凋亡的影响;RT-qPCR检测苦木碱F处理HeLa细胞后miR-331-3p的表达;miR-331-3p mimic或miR-331-3p inhibitor转染HeLa细胞,经苦木碱F处理后检测H eLa细胞的增殖及凋亡情况;使用生物信息学和双荧光素酶报告基因实验预测及验证miR-331-3p与蛋白酶体活化复合物3
【机 构】
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广东省妇幼保健院药学部,广东 广州 510010;广东省妇幼保健院医务科,广东 广州 510010
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目的:探讨苦木碱F调控miR-331-3p在宫颈癌HeLa细胞增殖及凋亡中的作用及机制.方法:MTT法检测苦木碱F对宫颈癌H eLa细胞增殖的影响;流式细胞术检测苦木碱F对宫颈癌H eLa细胞凋亡的影响;RT-qPCR检测苦木碱F处理HeLa细胞后miR-331-3p的表达;miR-331-3p mimic或miR-331-3p inhibitor转染HeLa细胞,经苦木碱F处理后检测H eLa细胞的增殖及凋亡情况;使用生物信息学和双荧光素酶报告基因实验预测及验证miR-331-3p与蛋白酶体活化复合物3(PSME3)的靶向关系;Western blot检测HeLa细胞中凋亡相关蛋白表达情况.结果:苦木碱F能显著抑制HeLa细胞增殖,促进凋亡,且具有浓度依赖性(P<0.01);苦木碱F显著上调HeLa细胞中miR-331-3p的表达(P<0.01);miR-331-3p mimic能显著抑制HeLa细胞增殖能力,促进细胞凋亡;miR-331-3p inhibitor能显著降低苦木碱F对HeLa细胞增殖的抑制以及凋亡的促进作用(P<0.05);生物信息学预测PSME3是miR-331-3 p的靶基因之一,双荧光素酶报告基因结果显示miR-331-3 p与PSME33\'UTR靶向结合;与苦木碱F+NC inhibitor+NC-siRNA组比较,苦木碱F+miR-331-3p inhibitor+NC-siRNA组中细胞存活率升高,细胞凋亡率降低,β-catenin和Bcl-2蛋白水平升高,Bax蛋白水平降低,而敲低PSME3能逆转这一结果,差异有统计学意义(P<0.05).结论:苦木碱F通过介导miR-331-3p/PSME3轴抑制宫颈癌HeLa细胞增殖,促进凋亡,发挥抗肿瘤作用.
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