【摘 要】
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目的分析补骨脂素对成骨细胞Caspase-3、8、9蛋白和Bcl-2、Bax、Bid蛋白的调控,探讨细胞凋亡信号途径和骨质疏松症的关系。方法选用1日龄SD大鼠获取原代的成骨细胞体外培养,
【机 构】
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广东省中西医结合医院,广州中医药大学,广州医科大学附属第一医院,
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目的分析补骨脂素对成骨细胞Caspase-3、8、9蛋白和Bcl-2、Bax、Bid蛋白的调控,探讨细胞凋亡信号途径和骨质疏松症的关系。方法选用1日龄SD大鼠获取原代的成骨细胞体外培养,细胞分成补骨脂素组、雌二醇组和正常组,补骨脂素组的培养基中添加补骨脂素,雌二醇组的培养基中添加雌二醇,正常组常规培养,采用MTT比色法检测补骨脂素的最佳浓度及最佳时间,荧光定量PCR法检测各组Caspase-3、8、9蛋白和Bcl-2、Bax、Bid蛋白的表达。结果在补骨脂素的最佳浓度及最佳时间方面,第8天时成骨细胞的OD值达最大值,而且以5μmol·L-1显著;对于Bax蛋白,与正常组比较,雌二醇组更能显著下调Bax蛋白的表达（P<0.05）。对于Bid蛋白,补骨脂素组较雌二醇组更能上调该蛋白的表达量（P<0.05）。对于Bcl-2蛋白,补骨脂素组的相对表达量高于雌二醇组和正常组（P<0.05）,而且补骨脂素组的Bcl-2/Bax的比值也高于雌二醇组（P<0.05）。在Caspase表达方面,相对于正常组,补骨脂素组和雌二醇组均能显著下调Caspase-3和Caspase-9蛋白的表达量（P<0.05）,而且补骨脂素组比雌二醇组更能下调Caspase-9蛋白的表达（P<0.05）。结论补骨脂素可以上调成骨细胞内Bid蛋白和Bcl-2蛋白的表达,结合补骨脂素对成骨细胞的增殖情况,提示补骨脂素有可能以上调抑制凋亡蛋白为主,而且补骨脂素可能通过线粒体途径进行细胞凋亡的调控。
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