【摘 要】
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通过探索不同的精子蛋白制备方法、水化液成分和优化2D电泳程序以建立牛精子蛋白质组学研究技术平台,同时以牛鲜冻精为实验材料通过差异凝胶电泳寻找冻融前后精子蛋白的改变.
【机 构】
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中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京100094;甘肃农业大学动物科学技术学院,兰州,730070;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京,100094;北京奶牛中心,北京,100085;农业部畜牧
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通过探索不同的精子蛋白制备方法、水化液成分和优化2D电泳程序以建立牛精子蛋白质组学研究技术平台,同时以牛鲜冻精为实验材料通过差异凝胶电泳寻找冻融前后精子蛋白的改变.结果 表明:使用改进的热TRIzol法裂解精子细胞制备蛋白,结合优化的2D电泳技术可建立稳定的牛精子蛋白质组学研究技术平台.差异凝胶电泳揭示牛精子在冻融后有质和量的改变:冻融后缺失的蛋白点有20个,表达下调的有2个,表达上调的有10个.作为一项阶段性的实验成果,研究建立的2D平台和所发现的冻融引起的差异表达蛋白质点为揭示冷冻损伤机理和性控精液的差异蛋白质组学研究奠定了较好的基础.
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