【摘 要】
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前一个时期,虽然分子生物学技术有了相当大的进步,但在构建基因全长较大的RNA病毒时,例如马铃薯Y病毒属全长侵染性cDNA克隆或者是RNA体外转录物时,会遇到很大的困难,其cDNA转
【机 构】
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中国热带农业科学院热带生物技术研究所,海南大学环境与植物保护学院,海南大学农学院
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(31171822;31371918)
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前一个时期,虽然分子生物学技术有了相当大的进步,但在构建基因全长较大的RNA病毒时,例如马铃薯Y病毒属全长侵染性cDNA克隆或者是RNA体外转录物时,会遇到很大的困难,其cDNA转入大肠杆菌（E.coli）感受态细胞时,可能会产生对宿主菌有毒性的物质,从而导致非特异性重组。这些问题可以利用插入内含子等方法来解决,但这些方法大多耗时费力且成功率低。以番木瓜环斑病毒（Papaya ringspot virus,PRSV）为例,介绍了在不插入内含子的情况下利用酵母同源重组系统在两周之内构建完成其侵染性克隆的方法
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