【摘 要】
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目的 探讨高致癌性HPV16E7病毒抗原肽体外诱生HLA-A2阳性正常人外周血抗原特异性CD8+细胞毒性T细胞(CTL)的表型及功能状态.方法 以HPV16E711-20合成多肽、重组人IL-7、IL-2体
【机 构】
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深圳市皮肤病防治研究所性病防治研究中心
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目的 探讨高致癌性HPV16E7病毒抗原肽体外诱生HLA-A2阳性正常人外周血抗原特异性CD8+细胞毒性T细胞(CTL)的表型及功能状态.方法 以HPV16E711-20合成多肽、重组人IL-7、IL-2体外刺激26例HLA-A2阳性正常人外周血T细胞,用HLA-A*0201限制性表位肽/YMLDLQPETT五聚体技术,结合流式细胞仪对抗原特异性CTL进行频率、表型[CD45RA+CD27-效应性CTL、CD45RA-CD27-效应性记忆CTL(TEM)、CD45RA-CD27+中枢性记忆CTL(TCM)、CD45+CD27+初始性CTL]及功能(穿孔素、颗粒酶B、FasL)分析,并以无关肽HBVcoxe18-27作为阴性对照.结果 病毒多肽体外刺激T细胞7 d后,抗原特异性CD8+CTL数为(0.73±0.33)%,比未刺激组的(0.02±0.03)%明显增多(P＜0.01).进一步分析,在抗原特异性CTL中,效应性CTL、TEM、TCM及初始性CTL百分比分别为(26.07±13.46)%、(7.97±7.11)%、(33.25±19.68)%及(32.73±13.89)%,均比未刺激组的(0.02±0.03)%、(0.02±0.03)%、(0.02±0.03)%及(0.02±0.05)%明显增多,P值均＜0.01.HPV16E711-20表位特异性CTL分泌穿孔素、颗粒酶B、Fas-L的水平分别为(47.01±18.69)%、(80.53±13.32)%及(26.48±7.81)%,均比未刺激组的(0.38±0.55)%、(0.34±0.22)%及(0.16±0.16)%明显增多,P值均＜0.01.结论 HPV16E711-20多肽诱导CD8+T细胞克隆扩增,产生抗原特异性CD8+CTL,分泌毒性细胞因子,通过不同机制特异性杀伤病毒感染的靶细胞,在抗病毒免疫应答中发挥作用.
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