【摘 要】
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目的:确定PCR扩增葡萄糖激酶基因启动子区以及用Alw21I内切酶切割-30位点的最佳实验条件.方法:对影响PCR反应以及酶切的实验因素进行系统研究.结果:最佳引物浓度为0.3μmol/L
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目的:确定PCR扩增葡萄糖激酶基因启动子区以及用Alw21I内切酶切割-30位点的最佳实验条件.方法:对影响PCR反应以及酶切的实验因素进行系统研究.结果:最佳引物浓度为0.3μmol/L;以1 U酶量效果最满意;最适DNTP浓度为167μmol/L;最适镁离子浓度为1.5mmol/L 20μL的酶切体系中,最佳酶切产物为5μL,最佳内切酶量为5 U,酶切时间应超过9 h.以上参数偏离最适条件将会导致实验失败.
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