论文部分内容阅读
目的
探讨靶向沉默活化的蛋白激酶C受体1(RACK1)基因对肺腺癌A549细胞化疗药物敏感性的影响及其可能作用机制。
方法构建靶向沉默RACK1基因的重组质粒,并转染至A549细胞,设RACK1基因沉默组(RACK1-shRNA组)、空载质粒组(Vector-shRNA组)、空白对照组,运用Western blot检测转染后RACK1蛋白的表达水平。MTT法检测转染后A549细胞对顺铂、吉西他滨、培美曲塞和紫杉醇4种化疗药物敏感性的变化。Western blot检测转染后肺耐药蛋白(LRP)和多药耐药蛋白(MRP)的表达。
结果转染24 h后,RACK1-shRNA组RACK1蛋白的相对表达量为0.267±0.470,低于Vector-shRNA组的0.821±0.109及空白对照组的0.842±0.060,差异有统计学意义(F=54.438,P<0.05)。RACK1-shRNA组细胞生长明显受到抑制,该组A549细胞对顺铂、紫杉醇的敏感性增加(作用36 h RACK1-shRNA组A549细胞增殖的抑制率与Vector-shRNA组、空白对照组相比,均P<0.05)。RACK1-shRNA组中LRP、MRP蛋白相对表达量分别为0.163±0.056、0.246±0.050,与Vector-shRNA组(0.420±0.080、0.644±0.057)及空白对照组(0.444±0.041、0.617±0.031)相比均下降,差异有统计学意义(FLRP=19.430、FMRP=61.548,均P<0.05)。
结论靶向沉默RACK1基因可提高A549细胞对铂类、紫杉醇类化疗药物的敏感性,其作用可能是通过下调LRP及MRP的表达而实现的。