【摘 要】
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为建立猪圆环病毒3型(PCV3)的血清学诊断方法,本研究构建了去除核定位序列的截短型Cap蛋白重组质粒,并进行了原核表达,纯化的重组蛋白经SDS-PAGE及Western-blot确认后,将其作为包被抗原,建立了PCV3抗体检测的间接ELISA方法。SDS-PAGE结果显示,表达的Cap重组蛋白约为39ku,Western-blot结果表明,重组蛋白具有良好的反应原性。通过方阵滴定法确定了最佳抗原包被浓度为10g/mL,最佳血清稀释度为1∶20,当血清样本D450≥0.301时,可判为PCV3抗体阳性。该
【机 构】
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华南农业大学兽医学院,广东省动物疫病预防控制中心,岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心
【基金项目】
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广东省现代农业产业技术体系生猪创新团队项目(2020KJ126)。
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为建立猪圆环病毒3型(PCV3)的血清学诊断方法,本研究构建了去除核定位序列的截短型Cap蛋白重组质粒,并进行了原核表达,纯化的重组蛋白经SDS-PAGE及Western-blot确认后,将其作为包被抗原,建立了PCV3抗体检测的间接ELISA方法。SDS-PAGE结果显示,表达的Cap重组蛋白约为39ku,Western-blot结果表明,重组蛋白具有良好的反应原性。通过方阵滴定法确定了最佳抗原包被浓度为10g/mL,最佳血清稀释度为1∶20,当血清样本D450≥0.301时,可判为PCV3抗体阳性。该
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