【摘 要】
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目的 制备高活性EB病毒立即早期蛋白Rta优势表位抗原,并初步评价该抗原在鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)诊断中的价值.方法 分析Rta氨基酸序列,选取抗原优势表位Rta(3
【机 构】
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东方海洋(北京)医学研究院,北京 100071烟台毓璜顶医院,山东烟台264000;艾维可生物科技有限公司,山东烟台264000;
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目的 制备高活性EB病毒立即早期蛋白Rta优势表位抗原,并初步评价该抗原在鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)诊断中的价值.方法 分析Rta氨基酸序列,选取抗原优势表位Rta(301～440aa),合成目的基因,连接pBVGST-6His载体,构建重组pBV-Rta表达质粒,进行诱导表达获得纯化抗原.采用间接ELISA初步评价优势表位抗原在鼻咽癌诊断中的价值,以纯化的pBV-Rta优势表位抗原为包被抗原,抗人IgA,IgG和IgM为二抗,检测由烟台毓璜顶医院提供的50例经临床病理确诊的NPC患者血清样本和90例健康体检者血清样本.结果 获得了高效原核表达的pBV-Rta优势表位抗原(301～440aa),经过小样本验证,确定pBV-Rta具有良好的抗原活性和特异度.放大样本进行检测,基于Rta优势表位抗原的Rta-IgG间接ELISA方法检测灵敏度和特异度分别为73.08％和95.79％.Rta-IgG检测的AUC值为0.860.结论 Rta优势表位抗原pBV-Rta是优选的可以用于Rta-IgG检测的抗原,利用该抗原所建立的间接ELISA检测方法可以很好地区分鼻咽癌患者和健康对照.
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