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Ｆ质粒的第五个ＥｃｏＲ Ｉ片段ｍｉｎｉ－Ｆ具有质粒的分配功能。其ＥｃｏＲ Ｉ－ＢａｍＨ Ｉ片段含有ｏｒｉＳ、ｃｃｄ、ｒｅｐＤ和ｓｏｐ基因（ｓｏｐＡ，Ｂ和Ｃ）。该片段与ｐＢＲ３２２重组，得到质粒ｐＤＭＣ３２。ｐＤＭＣ３２经Ｓｍａ Ｉ酶切，Ｔ４连接酶连接，得到衍生质粒ｐＤＭＣ３１１，消除了ｏｒｉＳ、ｃｃｄ和ｒｅｐＤ片段。ＭＩ３２（ｐＤＭＣ３２）和ＭＩ３１１（ｐＤＭＣ３１１），在液体限磷基础培养基中培养