【摘 要】
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目的?培养肝细胞癌类器官用于药物筛选，为肝细胞癌患者的个体化治疗提供参考。方法 将1例肝细胞癌患者的肿瘤组织消化为单细胞后接种于基质胶中培养。通过H-E染色观察类器官与原代肿瘤组织的细胞形态。采用免疫组织化学染色观察类器官与原代肿瘤组织中细胞角蛋白7（CK7）、细胞角蛋白8（CK8）、p53、磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC-3）等分子的表达情况。通过靶向测序检测类器官中肿瘤相关基因的突变情况。根据靶
【机 构】
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复旦大学生命科学学院和代谢与整合生物学研究院
【基金项目】
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国家自然科学基金（82073411）～～；
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目的?培养肝细胞癌类器官用于药物筛选，为肝细胞癌患者的个体化治疗提供参考。方法 将1例肝细胞癌患者的肿瘤组织消化为单细胞后接种于基质胶中培养。通过H-E染色观察类器官与原代肿瘤组织的细胞形态。采用免疫组织化学染色观察类器官与原代肿瘤组织中细胞角蛋白7（CK7）、细胞角蛋白8（CK8）、p53、磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC-3）等分子的表达情况。通过靶向测序检测类器官中肿瘤相关基因的突变情况。根据靶向测序结果进行药物筛选，采用CellTiter-Glo细胞活性检测试剂盒检测varlitinib[表皮生长因子受体/ erb-b2受体酪氨酸激酶2（ERBB2）特异性抑制剂]、索拉非尼（激酶多靶点抑制剂）、顺铂和nutlin3（p53激活剂）对类器官活性的影响。结果 成功建立了携带肿瘤蛋白p53（TP53）和ERBB2基因突变的肝细胞癌类器官。H-E染色结果显示，类器官与原代肿瘤组织具有极为相似的结构和细胞学特征。免疫组织化学染色结果显示，类器官与原代肿瘤组织中CK7均为阴性，CK8、p53和GPC-3均为阳性。靶向测序结果显示，类器官中的突变基因有TP53（E271K，100%）、ERBB2（A1232V，62.29%）、RUNX转录因子1（RUNX1）（E395A，20.21%）、雄激素受体（AR）（Q91dup，70%）。细胞活性检测结果显示，varlitinib和索拉非尼对类器官的IC50分别为2.81 μmol/L和1.327 μmol/L，顺铂对类器官的IC50为40.98 μmol/L，nutlin3对类器官生长无明显影响。结论 成功建立了1例携带TP53和ERBB2基因突变的肝细胞癌类器官，该类器官保留了原代肿瘤组织的结构和分子特征，药物筛选结果可能为肝细胞癌患者的个体化治疗提供参考。
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