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摘要 蔬菜和水果中有机氯、拟除虫菊酯类的检测一直是人们关注的重点和热点。该文探讨了采用气相色谱仪测定蔬菜和水果中9种有机氯、拟除虫菊酯类的方法，重点改进优化了样品前处理的技术方法，蔬菜和水果样品匀浆后，经乙腈提取，再经过分离、净化、浓缩，毛细管气相色谱柱分离，最后定量检测，能够准确测定蔬菜和水果中9種有机氯、拟除虫菊酯类。该文提供的方法操作简便快速、结果准确可靠，适合蔬菜和水果中有机氯、菊酯类农药残留的检测和安全监控。
关键词 农药残留；有机氯；拟除虫菊酯类；质量安全；检测方法
中图分类号 S481 .8 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2016）23-0118-02
农药的发明和使用大大提高了农作物的产量，其中有机氯、拟除虫菊酯类农药是继有机磷和氨基甲酸酯农药之后化学合成的一类生物活性优异、环境相容性好的杀虫剂，具有高效、光谱、低毒、低残留、能被生物降解等特点，已成为蔬菜和水果上防治害虫经常使用的杀虫剂[1-3]。但随着农药的大量和不合理使用，食品中的农药残留对人类健康造成的负面影响也日益凸显出来。国际食品法典委员会与世界各国对食品中农药残留量都有严格的规定，以保障食品的安全和人们的健康。目前，有机氯、拟除虫菊酯类农药残留已成为蔬菜和水果的常规检测项目。因此，建立蔬菜和水果中有机氯、拟除虫菊酯类农药残留分析检测方法迫在眉睫，且具有重大现实意义[1-3]。
前处理优化是有机氯、拟除虫菊酯类农药残留分析检测的关键步骤，前处理质量的高低直接影响分析结果的准确性和精密度[1，4-6]。该文采用均质、高速离心提取、固相萃取净化，并优化气相色谱（GC）检测方法，以建立快速、准确测定有机氯、拟除虫菊酯类农药残留的技术方法，为蔬菜中的农药残留和农产品质量安全的检测提供科学有效的方法。
1 材料与方法
1.1 试剂与标准品
试剂：乙腈，丙酮（重蒸），正己烷（重蒸），氯化钠，140 ℃烘烤4 h；弗罗里矽固相萃取柱（容量6 mL，填充物1 000 mg）。
农药标准品：9种有机氯和拟除虫菊酯类农药（百菌清、三唑酮、联苯菊酯、氯氟氰菊酯、甲氰菊酯、氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯）标准品100 μg/mL。
1.2 仪器及设备
气相色谱仪VARIAN3800（配有ECD电子捕获检测器），高速组织粉碎机，匀浆机，旋转蒸发仪，电热鼓风干燥箱，循环水式多用真空泵，氮吹仪，旋涡混合器，电子分析天平，超低温冰箱，移液枪（20～200 μL，100～1 000 μL，1 000～5 000 μL，1～10 mL）。
1.3 色谱条件
色谱柱：50%聚苯基甲基硅氧烷，30 m×0.32 mm×0.25 μm。色谱柱温度：柱温，150 ℃保持2 min，以6 ℃/min 升温至270 ℃（保持25 min）。进样口温度220 ℃；ECD检测器温度300 ℃。载气：氮气，纯度≥99.999%，流速为1.6 mL/min。进样模式：分流进样，分流比1∶10，进样量1 μL。
1.4 标准曲线的制作
混合标样的制备：首先准确量取9种有机氯和拟菊酯类农药的标准品，然后用己烷溶解混合定容至1 mL的进样瓶，将配好的混合标准储备液避光保存于-18 ℃冰箱中。根据表1的浓度要求将混合标准储备液稀释成标准系列浓度，取1.0 μL各浓度标准工作液，通过气相色谱仪测定分析，制作工作标准曲线[1]。
1.5 样品预处理
1.5.1 试料制备。取供试的蔬菜、水果样品1 kg，用干净纱布清洁可食部分的表面附着物，用四分法取对角线部分样品，经粉碎制样，待测样品保存于样品器以备测定使用。
1.5.2 提取。用电子天平准确称取上述供试的待测样品25.0 g，将样品置于烧杯中并加入50.0 mL乙腈，溶解后经匀浆机匀浆2 min后用滤纸过滤到装有5～7 g NaCl的100 mL具塞量筒中，直至收集40～50 mL濾液后用塞子盖好量筒，经剧烈震荡1 min后室温下静置30 min，从而使乙腈相和水相分层。
1.5.3 净化。吸取量筒中的提取液10.0 mL，并置于150 mL圆底烧瓶中，40 ℃水浴锅加热，蒸发近干，加入4.0 mL正己烷，待用。向弗罗里矽柱中加入4.0 mL丙酮∶正己炳（10∶90）活化，再加入4.0 mL正己烷平衡小柱，当溶剂液面到达柱吸附层表面时，迅速将上述正己烷待用液移入小柱，用15 mL刻度离心管接收洗脱液。用4.0 mL丙酮∶正己炳（10∶90）润洗圆底烧瓶合并上样，并重复1次。将装有淋洗液的离心管放置在氮吹仪上，在50 ℃的水浴温度条件下，通过氮吹蒸发至体积小于5 mL，再用正己烷准确定容至5.0 mL，然后在旋涡混合器上混匀，室温条件下静置10 min后取样待测[1，3-4]。
1.6 定量
所检测的样品中农药残留量以ω表示，单位为mg/kg，按下式计算：
式中：ω—标准溶液中农药的含量，单位为mg/kg；A—样品中被测农药的峰面积；As—农药标准溶液中被测农药的峰面积；V1—提取溶剂总体积；V2—吸取出用于检测的提取溶液的体积；V3—样品定容体积；m—样品的质量。
2 结果与分析
取供试的蔬菜样品，按照上述的方法进行回收试验，每个浓度设置3个平行（重复），并设空白对照。该方法的回收率如表2所示。空白基质样品、标准溶液（0.1 mg/kg）、添加回收（0.5 mg/kg）色谱图如图1所示。可以看出，9种有机氯类、拟菊酯类农药在测试蔬菜（韭菜、番茄、萝卜、青菜）中的平均添加回收率在70%～120%之间，本方法的回收率达到了农残检测的相关要求。
3 结论
通过上述的研究试验，发现该方法能够一次性准确地检测蔬菜中9种有机氯、拟除虫菊酯类农药残留，该方法操作简单、样品处理方法简易便捷、仪器要求较低、结果准确可靠，回收率在70%～120%之间，9种有机氯、拟除虫菊酯类农药的方法检出限达到0.02 mg/kg。可见，该方法为蔬菜中有机氯类、菊酯类农药残留的检测提供可靠的方法依据，并且准确可靠、便于推广使用。
4 参考文献
[1] 袁烁，曹之富，韦美蔓，等.固相萃取-气相色谱法检测蔬菜中8种菊酯类农药残留[J].食品安全质量检测学报，2015（5）：1719-1725.
[2] 王朝瑾，李彦磊，王文豪，等.菊酯类农药残留的快速测定[J].湖南农业科学，2010（1）：71-73.
[3] 李军.苹果中拟除虫菊类农药残留测定方法的研究[J].山东农业科学，2013，45（12）：87-90.
[4] 钟艳梅.茶叶中有机氯类及菊酯类农药检测方法的改进[J].广州食品工业科技，2002，19（4）：94-95.
[5] 郑中西，林华影.有机氯农药残留量测定中几种前处理方法的比较与分析[J].中国公共卫生，2001，17（5）：4482-4491.
[6] 张仟春，肖小华，李攻科.样品前处理-色谱在线分析农药残留的研究进展[J].分析科学学报，2013，4（29）：573-578.
关键词 农药残留；有机氯；拟除虫菊酯类；质量安全；检测方法
中图分类号 S481 .8 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2016）23-0118-02
农药的发明和使用大大提高了农作物的产量，其中有机氯、拟除虫菊酯类农药是继有机磷和氨基甲酸酯农药之后化学合成的一类生物活性优异、环境相容性好的杀虫剂，具有高效、光谱、低毒、低残留、能被生物降解等特点，已成为蔬菜和水果上防治害虫经常使用的杀虫剂[1-3]。但随着农药的大量和不合理使用，食品中的农药残留对人类健康造成的负面影响也日益凸显出来。国际食品法典委员会与世界各国对食品中农药残留量都有严格的规定，以保障食品的安全和人们的健康。目前，有机氯、拟除虫菊酯类农药残留已成为蔬菜和水果的常规检测项目。因此，建立蔬菜和水果中有机氯、拟除虫菊酯类农药残留分析检测方法迫在眉睫，且具有重大现实意义[1-3]。
前处理优化是有机氯、拟除虫菊酯类农药残留分析检测的关键步骤，前处理质量的高低直接影响分析结果的准确性和精密度[1，4-6]。该文采用均质、高速离心提取、固相萃取净化，并优化气相色谱（GC）检测方法，以建立快速、准确测定有机氯、拟除虫菊酯类农药残留的技术方法，为蔬菜中的农药残留和农产品质量安全的检测提供科学有效的方法。
1 材料与方法
1.1 试剂与标准品
试剂：乙腈，丙酮（重蒸），正己烷（重蒸），氯化钠，140 ℃烘烤4 h；弗罗里矽固相萃取柱（容量6 mL，填充物1 000 mg）。
农药标准品：9种有机氯和拟除虫菊酯类农药（百菌清、三唑酮、联苯菊酯、氯氟氰菊酯、甲氰菊酯、氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯）标准品100 μg/mL。
1.2 仪器及设备
气相色谱仪VARIAN3800（配有ECD电子捕获检测器），高速组织粉碎机，匀浆机，旋转蒸发仪，电热鼓风干燥箱，循环水式多用真空泵，氮吹仪，旋涡混合器，电子分析天平，超低温冰箱，移液枪（20～200 μL，100～1 000 μL，1 000～5 000 μL，1～10 mL）。
1.3 色谱条件
色谱柱：50%聚苯基甲基硅氧烷，30 m×0.32 mm×0.25 μm。色谱柱温度：柱温，150 ℃保持2 min，以6 ℃/min 升温至270 ℃（保持25 min）。进样口温度220 ℃；ECD检测器温度300 ℃。载气：氮气，纯度≥99.999%，流速为1.6 mL/min。进样模式：分流进样，分流比1∶10，进样量1 μL。
1.4 标准曲线的制作
混合标样的制备：首先准确量取9种有机氯和拟菊酯类农药的标准品，然后用己烷溶解混合定容至1 mL的进样瓶，将配好的混合标准储备液避光保存于-18 ℃冰箱中。根据表1的浓度要求将混合标准储备液稀释成标准系列浓度，取1.0 μL各浓度标准工作液，通过气相色谱仪测定分析，制作工作标准曲线[1]。
1.5 样品预处理
1.5.1 试料制备。取供试的蔬菜、水果样品1 kg，用干净纱布清洁可食部分的表面附着物，用四分法取对角线部分样品，经粉碎制样，待测样品保存于样品器以备测定使用。
1.5.2 提取。用电子天平准确称取上述供试的待测样品25.0 g，将样品置于烧杯中并加入50.0 mL乙腈，溶解后经匀浆机匀浆2 min后用滤纸过滤到装有5～7 g NaCl的100 mL具塞量筒中，直至收集40～50 mL濾液后用塞子盖好量筒，经剧烈震荡1 min后室温下静置30 min，从而使乙腈相和水相分层。
1.5.3 净化。吸取量筒中的提取液10.0 mL，并置于150 mL圆底烧瓶中，40 ℃水浴锅加热，蒸发近干，加入4.0 mL正己烷，待用。向弗罗里矽柱中加入4.0 mL丙酮∶正己炳（10∶90）活化，再加入4.0 mL正己烷平衡小柱，当溶剂液面到达柱吸附层表面时，迅速将上述正己烷待用液移入小柱，用15 mL刻度离心管接收洗脱液。用4.0 mL丙酮∶正己炳（10∶90）润洗圆底烧瓶合并上样，并重复1次。将装有淋洗液的离心管放置在氮吹仪上，在50 ℃的水浴温度条件下，通过氮吹蒸发至体积小于5 mL，再用正己烷准确定容至5.0 mL，然后在旋涡混合器上混匀，室温条件下静置10 min后取样待测[1，3-4]。
1.6 定量
所检测的样品中农药残留量以ω表示，单位为mg/kg，按下式计算：
式中：ω—标准溶液中农药的含量，单位为mg/kg；A—样品中被测农药的峰面积；As—农药标准溶液中被测农药的峰面积；V1—提取溶剂总体积；V2—吸取出用于检测的提取溶液的体积；V3—样品定容体积；m—样品的质量。
2 结果与分析
取供试的蔬菜样品，按照上述的方法进行回收试验，每个浓度设置3个平行（重复），并设空白对照。该方法的回收率如表2所示。空白基质样品、标准溶液（0.1 mg/kg）、添加回收（0.5 mg/kg）色谱图如图1所示。可以看出，9种有机氯类、拟菊酯类农药在测试蔬菜（韭菜、番茄、萝卜、青菜）中的平均添加回收率在70%～120%之间，本方法的回收率达到了农残检测的相关要求。
3 结论
通过上述的研究试验，发现该方法能够一次性准确地检测蔬菜中9种有机氯、拟除虫菊酯类农药残留，该方法操作简单、样品处理方法简易便捷、仪器要求较低、结果准确可靠，回收率在70%～120%之间，9种有机氯、拟除虫菊酯类农药的方法检出限达到0.02 mg/kg。可见，该方法为蔬菜中有机氯类、菊酯类农药残留的检测提供可靠的方法依据，并且准确可靠、便于推广使用。
4 参考文献
[1] 袁烁，曹之富，韦美蔓，等.固相萃取-气相色谱法检测蔬菜中8种菊酯类农药残留[J].食品安全质量检测学报，2015（5）：1719-1725.
[2] 王朝瑾，李彦磊，王文豪，等.菊酯类农药残留的快速测定[J].湖南农业科学，2010（1）：71-73.
[3] 李军.苹果中拟除虫菊类农药残留测定方法的研究[J].山东农业科学，2013，45（12）：87-90.
[4] 钟艳梅.茶叶中有机氯类及菊酯类农药检测方法的改进[J].广州食品工业科技，2002，19（4）：94-95.
[5] 郑中西，林华影.有机氯农药残留量测定中几种前处理方法的比较与分析[J].中国公共卫生，2001，17（5）：4482-4491.
[6] 张仟春，肖小华，李攻科.样品前处理-色谱在线分析农药残留的研究进展[J].分析科学学报，2013，4（29）：573-578.