【摘 要】
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目的证实乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)前基因组RNA在458nt～1308nt(nt,核苷酸)之间可发生剪接并产生相应的基因组剪接变异体. 方法对1株分离自慢性乙型肝炎患者血清的亚基因组HBV DNA(2366bp)进行测序并以Vector NTI6.0软件进行分析.将全基因组HBV DNA(3215bp)理论上可能的剪接供体及受体内的核苷酸进行定点突变并将突变株转染
【机 构】
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350004,福州,福建医科大学分子医学研究中心
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目的证实乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)前基因组RNA在458nt～1308nt(nt,核苷酸)之间可发生剪接并产生相应的基因组剪接变异体. 方法对1株分离自慢性乙型肝炎患者血清的亚基因组HBV DNA(2366bp)进行测序并以Vector NTI6.0软件进行分析.将全基因组HBV DNA(3215bp)理论上可能的剪接供体及受体内的核苷酸进行定点突变并将突变株转染HepG2细胞,以位于HBV DNA 458nt及1308nt两侧的特异引物检测转染后的细胞内HBV核心颗粒DNA,并以相同引物检测458nt～1308nt发生缺失的HBV DNA在不同病程的乙型肝炎患者血清中的存在情况. 结果2366bp HBV DNA在458nt～1308nt之间发生缺失并符合GT-AG剪接模式.3215bp全基因组HBV DNA在459nt及1306nt分别发生G→A及A→C突变后均不能产生458nt～1308nt缺失.458nt～1308nt发生缺失的HBV DNA在慢性乙型肝炎、肝硬化及原发性肝细胞癌患者血清的检出率分别为80%、75%及70%,显著高于HBV无症状携带者10%的检出率. 结论 HBV前基因组RNA在458nt～1308nt之间可发生剪接并产生长度为2366bp的基因组剪接变异体.该类型基因组剪接变异体基因结构特点及在HBV相关性肝病中广泛存在提示它与HBV致病性密切相关.
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