肺组织蛋白质组双向电泳技术的建立

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目的对肺组织蛋白质组分析中的双向电泳(2-DE)技术进行质量控制.方法通过多种条件的组合与优化,建立以物理和化学两种方法充分裂解组织细胞,并采用低温操作、加入蛋白酶抑制剂等防止蛋白降解,最后离心去除不溶性杂质的肺组织蛋白质组2-DE样品制备方法.第1向电泳为固相pH梯度等电聚焦、第2向电泳为垂直平板SDS-PAGE(T=13).结果通过对蛋白定量、样品制备、第1向和第2向电泳中的各个实验环节进行控制和优化,正常大鼠肺组织在18 cm pH 3-10 L的胶上可分离720个点左右,蛋白点平均匹配率为72.2
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