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以烟草花叶病毒的赖氨酸突变体（TMV—EPMK）为半抗原载体，利用“点击化学”反应，将半抗原小分子雌三醇（E3）经由两个不同亲／疏水性的连接臂修饰在TMV—EPMK上，成功制备了TMV．EPMK／E3完全抗原。通过免疫实验发现，以亲水性连接臂制备的TMV—EPMK／E3偶联体可在小鼠体内诱导更高水平的E3特异性免疫反应，所产生的IgG抗体的滴度达21800。该结果表明，以烟草花叶病毒为载体制备的完全抗原，其免疫原性受连接臂性质的影响，亲水性的连接臂更有利于抗体反应的发生。